%0 Journal Article
%T 丙型肝炎病毒5＇NCR转基因细胞模型及在反义核酸药物筛选和评价中的应用
%A 王小红
%A 王升启
%A 管伟
%A 毛秉智
%J 自然科学进展
%D 2001
%I 
%X 为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒(HCV)药物的筛选及评价,将HCV5＇NCR-C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体,通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定,获得HCV5＇NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-ne04,将其转染HepG2细胞,经GA18筛选,从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706.该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性,转基因拷贝数为140.利用该细胞株,通过脂质体介导,对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸(ASODNs)即HCV363,HCV349,HCV279进行了活性评价,结果显示,三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性,浓度在0.5μmol/L时,三者对HCV5＇NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61%,55%及48%.该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径.
%K 丙型肝炎病毒
%K 反义寡核苷酸
%K 荧光素酶
%K HepG2.9706细胞
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=96E6E851B5104576C2DD9FC1FBCB69EF&jid=504AF8C1E5476CA7C4EC9DF6FEAC14AC&aid=215A412F940D0292&yid=14E7EF987E4155E6&vid=708DD6B15D2464E8&iid=E158A972A605785F&sid=E57FE519484CFB70&eid=AC2617B68B137D9D&journal_id=1002-008X&journal_name=自然科学进展&referenced_num=1&reference_num=6