%0 Journal Article %T 拟南芥磷酸肌醇特异性磷脂酶AtPLC6基因的克隆与表达 %A 徐小静 %J 科学通报 %D 2004 %I %X 利用文库筛选和RT-PCR方法、从拟南芥中克隆到长度为1954bp,包括全长1734bp编码区的AtPLC6 cDNA.推测其编码一含有578个氨基酸的多肽、其等电点为7.24,分子量为66251.84Da.在GenBank中进行序列比对发现,AtPLC6为一新发现的拟南芥PI-PLC基因.对推测的氨基酸序列结构的分析表明,AtPLC6具有EF手性结构、X结构域、Y结构域和C2结构域,与植物中已知的其他磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)在结构上相似,类似于动物中典型的δ-型磷酸肌醇特异性磷脂酶.将AtPLC6的编码区序列插入原核表达载体后进行了原核表达,纯化的AtPLC6重组蛋白可水解PIP2产生IP3和DAG,且水解活性呈明显的钙依赖特性、反应的最适Ca^2 浓度为10μmol/L.Northern分析结果表明,在检测的根、茎、叶、花、果和幼苗中均有ArLC6 mRNA的转录,但转录水平较低.用ABA,NaCl,冷和热等胁迫处理的实验表明,AtPLC6 mRNA的转录受到冷胁迫的诱导,而受ABA,NaCl和热等胁迫影响较小,推测AtPLC6可能参与了植株对冷胁迫的响应. %K 拟南芥 %K 基因克隆 %K 原核表达 %K 冷胁迫 %K 磷酸肌醇 %K 特异性磷脂酶 %K AtPLC6基因 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=4986D240A9F34ACC&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=E158A972A605785F&sid=8C27CCA578E52082&eid=F7BB24011DC0D223&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=0&reference_num=36