%0 Journal Article
%T 植物NAD-IDH基因克隆及体外表达酶活力分析
%A 陈德富
%A 陈喜文
%J 科学通报
%D 2004
%I 
%X 植物NAD^ -依赖型异柠檬酸脱氢酶(NAD-IDH)是一多功能酶．以拟南芥生态型“Columbia gll“及甘蓝型油菜三系“陕2A”．“陕2B”和“垦Cl”的叶片为材料．采用RT-PCR方法成功地从每种植物材料中分别克隆了3种NAD—IDH不同亚基基因．同源性搜索发现，来源于油菜的克隆基因是新基因．将克隆基因的功能蛋白编码区整合到pMID1多克隆位点．构建表达重组体．均能在体外翻译系统中高效地表达出特异目的蛋白．亚基0，亚基1和亚基2基因转录本加入到含终浓度为36μg／mL的二硫键异构酶的体外翻译系统，体外表达产物中检测到NAD—IDH酶活力．不同基因种类及转录本分子比的体外表达产物的酶比活力比较表明，NAD—IDH由3种亚基组成．缺一不可．缺少亚基0是致命的，缺少亚基1或2中的任何一个对酶活力的损伤是严重的．同时发现，来源于陕2A和陕2B的亚基1基因转录本中存在碱基缺失现象，从而发生移框突变或无义突变．使突变亚基不表现正常亚基1功能，导致油菜品系间叶片NAD-IDH酶比活力存在差异。
%K 植物
%K NAD-IDH基因克隆
%K 体外表达
%K 小麦胚芽
%K 无细胞蛋白质合成系统
%K 二硫键异构酶
%K 甘蓝型油菜
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=6E7246AF6DECB711&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=0B39A22176CE99FB&sid=BA79719BCA7341D5&eid=43608FD2E15CD61B&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=0&reference_num=20