%0 Journal Article
%T 用双杂交系统发现与CPP32相互作用的新型分子的初步研究
%A 叶棋浓
%J 科学通报
%D 1998
%I 
%X 作为ICE蛋白酶家族的一员 ,CPP32 (又称Yama ,Apopain)在许多形式的凋亡途径中起极其重要的作用 .为研究调控CPP32的分子 ,本文运用酵母双杂交系统杂找与CPP32相互作用的分子 .首先将CPP32基因克隆到 pGBT9质粒载体中 ,得到的重组质粒命名为pGBT9/CPP .然后将 pGBT9/CPP转化酵母菌HF7C ,再导入人白血病文库质粒 ,用营养缺陷培养基 (TrpLeuHis)初步筛选文库中插入cDNA所编码的序列与CPP32相互作用的菌落 ,再进一步检测 β 半乳糖苷酶活性 .我们共得到 4 2个在营养缺陷培养基上生长的菌落。β_半乳糖苷酸活性检测表明 ,只有 5个菌落在显色底物X_gal的存在下变蓝色 .提取该 5个阳性酵母菌落的质粒 ,电击转化E .coliHB10 1.提取文库质粒 ,经酶切鉴定、重新转化及序列测定后发现 ,与CPP32相互作用的分子为一新型 15肽 ,推测它可能是与CPP32相互作用的结构域
%K 双杂交系统
%K CPP32
%K 肽
%K 蛋白酶
%K 细胞死亡
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=D6083927DF94D57CAA8153E4000B1D64&yid=8CAA3A429E3EA654&vid=BE33CC7147FEFCA4&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=6AC2A205FBB0EF23&eid=E84BBBDDD74F497C&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=0&reference_num=0