%0 Journal Article %T 体细胞克隆法生产绵羊转基因囊胚 %A 安晓荣 %A 苟克勉 %A 陈永福 %J 科学通报 %D 2001 %I %X pEGFP-N1质粒分别转染5只绵羊卵巢原代颗粒细胞,G418筛选后,各取1株阳性转基因细胞作供体,进行绵羊的体细胞核移植(克隆),共352枚体外成熟的去核卵母细胞与转基因的颗粒细胞进行电融合,得到的329枚核移植胚胎(93.5%),用Ionomycin/6-DMAP激活,SOFaaBSA液滴体外培养7d,结果显示,312枚核移植胚胎发生卵裂(94.8%),其中63枚发育至囊胚阶段(19.1%),随机抽检发现,克隆胚胎在早期发育的各个阶段均表达GFP基因,4株0.5%FCS饥饿细胞克隆胚胎的囊胚率为19.6%(55/280),胎在早期发育的各个阶段均表达GFP基因,4株0.5%FCS饥饿细胞克隆胚胎的囊胚率为19.6%(55/280),与另外1株未饥饿细胞克隆胚胎的囊胚率(16.3%,8/49)没有显著差异(P>0.05),结果表明,体细胞基因转移和克隆技术的结合,可以有效地生产绵羊的转基因囊胚。 %K 绵羊 %K 颗粒细胞 %K 体细胞核移植 %K 转基因囊胚 %K 基因克隆 %K 基因转移 %K 绿色荧光蛋白基因 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=2A6C64E3A39DBB53&yid=14E7EF987E4155E6&vid=D997634CFE9B6321&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=45D68DF69BA881EC&eid=CE504F5B1E192581&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=7&reference_num=20