%0 Journal Article
%T 丙肝病毒全基因组cDNA克隆侵染细胞培养体系的建立
%A 姚相杰
%J 科学通报
%D 2004
%I 
%X 以含有丙肝病毒全基因组cDNA的重组质粒(pHCV)为材料，通过基因转染、重组痘病毒辅助使之在HeLa细胞中表达HCV病毒体，建立了一种新的HCV体外细胞培养系统，采用RT-PCR，荧光定量RT-PCR，链特异性RT—PCR，免疫印迹，免疫电子显微镜和电子显微镜负染技术跟踪检测HCV的增殖效率，结果显示，该培养体系中有HCV正链RNA的合成和HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达，并组装成直径约47nm的HCV病毒体，病毒体可被偶联有胶体金的抗HCV结构蛋白E2的单抗标记；该体系产生的HCV病毒体滴度达10^7基因拷贝／mL，远远高于病人血清中的HCV基因拷贝数，也高于迄今报道的任何一种HCV细胞培养体系的病毒滴度，检测结果证明，转染细胞裂解上清中的HCV病毒体可以感染肝癌细胞系Huh7，并在感染细胞中增殖和合成负链RNA中间体，病毒滴度达10^6基因拷贝／mL。
%K 丙型肝炎病毒
%K 全基因组
%K 侵染性cDNA克隆
%K 重组痘病毒
%K 细胞培养体系
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=3DB2C7E5CABB21A6&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=78AF84DBB4041008&eid=714E16F7CF56F343&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=3&reference_num=25