%0 Journal Article %T 阴沟肠杆菌B8拮抗活性相关基因的克隆与分析 %A 余旭平 %J 科学通报 %D 2004 %I %X 为研究具有广谱拮抗活性的阴沟肠杆菌B8的拮抗机理,应用自杀性质粒pZJ25,将Tn5转座到B8的染色体上,筛选到2株拮抗活性丧失的菌株.选择其中B8F突变株,应用Tn5上的Kan^r基因作为标签,对Tn5插入位点右侧的拮抗活性相关基因片段进行了克隆,筛选得到质粒pTLF,经亚克隆后测序,获得F片段735 bp的序列.提取原始菌株B8基因组DNA,酶切后与Pst I接头连接,应用接头引物和根据F片段设计的特异引物,在F片段的左右两侧进行染色体步行,获得了F片段(Tn5插入位点)左侧的1106 bp序列和F片段右侧的664 bp序列.生物信息学分析显示,获得的B8菌株拮抗相关基因序列包含3个ORF,与Pantoea agglomerans的andrimid生物合成基因簇(基因GenBank登录号AY192157)有较高的同源性,分别对应于admM,admN和admO共3个基因.被Tn5插入破坏的ORF(命名为anrF基因)对应于admM(Polyketide 合酶基因),插入位点位于终止密码前214 bp处.由此证明,anrF基因与B8菌株的拮抗活性相关,推测B8菌株产生的拮抗物质为andrimid. %K 阴沟肠杆菌B8 %K 拮抗机理 %K anrF基因 %K andrimid生物合成基因簇 %K 基因克隆 %K 生物防治 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=FA68B73C7C646EE6&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=2A3781E88AB1776F&iid=59906B3B2830C2C5&sid=BAEC9CADFE1F0CCC&eid=EEBB803F60D7DC4B&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=0&reference_num=21