%0 Journal Article
%T 耐辐射球菌DNA修复开关基因pprI缺陷性突变和功能补偿性突变株的建立
%A 高冠军
%A 陆辉明
%A 黄丽芬
%A 华跃进
%J 科学通报
%D 2005
%I 
%X PprI是近来在耐辐射球菌Deinococcus,radiodurans中发现的一个极其重要的DNA修复开关基因.以已测序的野生型菌株R1为材料,运用PCR突变法将克隆具有自身GroEL启动子和卡那霉素抗性基因的DNA片段反向重组到pprI基因中去,首次获得了卡那霉素抗性的、pprI功能完全破坏的突变株YR1.辐射细胞生存率结果表明,YR1对辐射异常敏感.另外,将含有GroEL启动子和卡那霉素抗性基因的DNA片段重组到质粒pRADZ3中,获得了具有卡那霉素抗性的表达质粒pRADK;再将体外克隆的具有pprI完整基因和C-末端结构域截短的PprI蛋白基因片段分别重组到pRADK中.研究结果表明,含有pprI完整基因的表达质粒在YR1中能够正常表达,并完全恢复到野生型的极端抗性;而C-末端结构域截短的PprI蛋白基因片段虽能在YR1中正常表达,但对辐射异常敏感,不能恢复其极端抗性.上述pprI基因功能缺陷性和功能补偿性突变株的建立,为深入研究细胞体内PprI蛋白质的定位、结构域与功能的关系,以及原位研究PprI蛋白质的理化特性提供了十分有效的方法.
%K Deinococcus
%K radiodurans
%K R1
%K pprI
%K 突变
%K 补偿
%K 功能
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=FF8111AFED841D5A&yid=2DD7160C83D0ACED&vid=771152D1ADC1C0EB&iid=38B194292C032A66&sid=E1D946F217E3B046&eid=FE4C96E058BB2280&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=4&reference_num=20