%0 Journal Article
%T HSV/AAV嵌合病毒法制备rAAV/hFⅨ及其安全性检测
%A 陈立
%A 邹蓓艳
%A 陈浩明
%A 伍志坚
%A 吴小兵
%A 卢大儒
%A 薛京伦
%J 科学通报
%D 2003
%I 
%X 构建了由CMV启动子调控的人凝血因子Ⅸ小基因的重组腺相关病毒载体, 并通过HSV/AAV杂合辅助病毒的方法大量制备成重组腺相关病毒颗粒(rAAV/hFⅨ). 经Southern dot blot及QC-PCR法测定, 滴度达到3.6 × 1012 vg(病毒基因组)/mL. 将rAAV/hFⅨ病毒以7.5 × 1011 vg/只直接注射到血友病B小鼠股四头肌中, 检测到人Ⅸ因子最高表达量达到387 ng/mL血浆, 持续表达时间12周. 血浆中产生的抗体情况与表达曲线相吻合. 实验结果表明, 采用HSV/AAV杂合辅助病毒法能够有效解决AAV载体的大量制备问题, QC-PCR法检测重组腺相关病毒的滴度比传统的点杂交法更加快速准确. RT-PCR检测表明重组AAV中没有野生型HSV的污染, PCR检测表明重组AAV注射后, 重组AAV病毒仅存在于注射点附近的肌肉中, 未见扩散.
%K 重组腺相关病毒载体
%K 凝血因子
%K IX小基因
%K 杂合病毒
%K HSV／AAV嵌合病毒法
%K 血友病B
%K QC-PCR
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=7C7E63796F062382A606A3A9833B8C05&jid=B40D4BA57FF46E45205A09B4DC283152&aid=BFE20DECC736438B&yid=D43C4A19B2EE3C0A&vid=B6DA1AC076E37400&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=1A775ABEB80E436B&eid=10343777FBBF55D5&journal_id=0023-074X&journal_name=科学通报&referenced_num=2&reference_num=18