%0 Journal Article %T Transformation of Flammulina velutipes with a basic fibroblast growth factor (bFGF) by Agrobacterium tumefaciens
农杆菌介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)转化金针菇的研究 %A LI Wei %A LIU Xiu-Ming %A LI Hong-Zhi %A JIANG Ying %A DU Mei-Li %A ZHU Hai-Lin %A WANG Yi %A LI Tian-Hang %A LI Hai-Yan %A LI Xiao-Kun %A
李巍 %A 刘秀明 %A 李洪志 %A 江莺 %A 杜美丽 %A 朱海林 %A 王一 %A 李天航 %A 李海燕 %A 李校堃 %J 菌物学报 %D 2011 %I %X 构建了金针菇表达载体p139035S-bFGF,并将重组质粒转入到根癌农杆菌EHA105中。以白金针菇Flammulina velutipes菌丝球为受体材料,用根癌农杆菌介导转入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。金针菇菌株对潮霉素(Hyg)抗性测验结果表明,在PDA固体培养基上的潮霉素筛选浓度为9μg/mL,在液体培养基中为6μg/mL。探索头孢霉素(Cefotaxime)对菌丝的毒性实验、农杆菌的菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)的添加及其浓度的控制、共培养的时间等因素对转化效率的影响。结果表明,Cef对金针菇菌丝几乎无抑制作用,最佳抑菌浓度为400μg/mL;农杆菌的菌液浓度OD600为0.5,侵染时间在30min左右,在AS为200μmol/L的共培养基上共培养72h,转化率最高。PCR与Southern杂交结果证明bFGF基因已整合到金针菇的基因组中。在无选择压力的PDA固体培养基上继代培养5次后仍检测到bFGF基因的存在,表明bFGF基因在转基因金针菇中稳定遗传。 %K Flammulina velutipes %K basic fibroblast growth factor %K Agrobacterium tumefaciens %K genetic transformation
金针菇,碱性成纤维细胞生长因子,农杆菌,遗传转化 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=CA9F815FCB0F62294C4266BB6F902ACB&aid=5D7CFF5C063113C646151EFB2A0E4158&yid=9377ED8094509821&vid=340AC2BF8E7AB4FD&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=D997634CFE9B6321&eid=8E6AB9C3EBAAE921&journal_id=1672-6472&journal_name=菌物学报&referenced_num=0&reference_num=38