%0 Journal Article
%T THE CONSTRUCTION OF DNA VECTOR AND SPHEROPLAST TRANSFORMATION AND REGENERATION OF USTILAGO MAYDIS
玉米黑粉菌DNA载体的构建和它的原生质球的转化和再生
%A DENG DA-LUN
%A TIEN PO
%A LU SHI-YI Institute of Microbiology
%A Academia Sinica
%A Beijing
%A
邓大纶
%A 田波
%A 陆师义
%J 菌物学报
%D 1993
%I
%X 我们用玉米黑粉菌(Ustilago maydis)热休克基因(Heat shock gene hsp 70)的启动子和终止子与新霉素磷酸转移酶基因相连,构建成了有效的双功能质粒pDLl(在E。Coli中用Amp作为选择标记,在玉米黑粉菌中用新霉素作为选择标记)o以分离的一株新霉素敏感的玉米黑粉菌作为受体菌,用构建的pDLl质粒作为供体DNA,对影响受体菌原生质球的形成条件(培养基、菌龄、各种酶、酶的浓度、作用时间和渗透压稳定剂)、再生条件和DNA转化条件进行了初步研究。对数前中期收集的菌体,以5mg/m1真菌溶壁酶处理30分钟左右,90%都形成原生质球,其再生率为60—80%,转化率为300—1000转化子/μg DNA。随机选出25个转化子,DNA杂交都为阳性。分析dot-blot和Southern blot DNA杂交结果,发现质粒在细胞中以整合形式存在,一个细胞可以有多拷贝的整合质粒,质粒可能以非完 全同源性的重组形式,参人性地整合进染色体中。
%K Ustilago maydis
%K Construction of DNA vector
%K Transformation and regeneration of spheroplast
玉米黑粉菌
%K DNA载体的构建
%K 原生质球转化和再生
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=CA9F815FCB0F62294C4266BB6F902ACB&aid=A7B21A43FE72EAD2E01223ECC83D3F80&yid=D418FDC97F7C2EBA&vid=59906B3B2830C2C5&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1672-6472&journal_name=菌物学报&referenced_num=0&reference_num=0