%0 Journal Article %T 用λZAPExpress作载体构建金针菇子实体表达型cDNA文库* %A 周凯松 %A 常宁 %A 彭俊峰 %A 张晗星 %A 张长铠 %J 菌物学报 %D 2003 %I %X 采用QuickPrepmicromRNAPurification试剂盒从新鲜金针菇子实体中快速提取、纯化mRNA,TimeSavercDNASynthesis试剂盒逆转录成cDNA分子后,通过在cDNA分子两端加上EcoRⅠ/NotⅠ接头,在T4多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAPExpressPredigestedVector连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coliXL1-BlueMRF捁菇ǔ杀泶颿DNA文库。经检测:文库滴度为4.0×106pfu/ml,文库扩增后,滴度达2.0×1010pfu/ml,重组率为90%,cDNA分子长度在0.3-3.5Kb范围。应用原位免疫杂交,初步筛选出火菇素相关基因的阳性克隆。 %K 滴度 %K 重组率 %K 免疫筛选 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=CA9F815FCB0F62294C4266BB6F902ACB&aid=99E7A50A7CE692089C03EE4C5FD2BA27&yid=D43C4A19B2EE3C0A&vid=BC12EA701C895178&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1672-6472&journal_name=菌物学报&referenced_num=0&reference_num=0