%0 Journal Article
%T TaqMan-MGB probe real-time fluorescence quantitative RT-PCR for rapid detection of taura syndrome virus in shrimps<br>TaqMan-MGB探针法快速检测对虾Taura合征病毒的研究
%A WEI Xin-xian
%A TONG Gui-xiang
%A XIE Zong-sheng
%A LI Xiao-zheng
%A WU Xiang-qing
%A LIAO Yong-zhi
%A HUANG Guo-qiu
%A <br>韦信贤
%A 童桂香
%A 谢宗升
%A 黎小正
%A 吴祥庆
%A 廖永志
%A 黄国秋
%J 海洋科学
%D 2011
%I 
%X 为建立Taura综合征病毒（Taura syndrome virus，简称TSV）的TaqMan—MGB探针荧光定量RT-PC方法，根据TSV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和TaqMan—MGB探针，扩增产物长度为118bp。将PCR产物克隆到pGM—T载体，重组质粒经筛选鉴定、SalⅠ单酶切，得到线性化转录模板DNA，经体外转录获得标准品RNA。以体外转录的RNA作为模板，进行一步法荧光定量RT-PCR反应，根据RNA模板拷贝数与Ct（Cycle threshold，Ct）值制备了标准曲线，制作的标准曲线在2×10^1拷贝／μL≤TSV RNA≤2×10^7拷贝／此的范围内具良好的线性关系，可以用于TSV的定量分析，检测灵敏度为20个拷贝数。特异性、重复性试验结果表明，该方法对SPF对虾组织RNA没有扩增反应，表现出良好的特异性；组内和组间实验变异系数分别为0．32％～1．84％和0．79％-2．71％。利用TaqMan—MGB探针建立检测TSV的一步法荧光定量RT-PCR方法可用于对虾TSV的检测。
%K TSV
%K TaqMan-MGB probe
%K one step real-time RT-PCR<br>TSV
%K Taqman-MGB探针
%K 一步法荧光定量
%K RT-PCR
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=E62459D214FD64A3C8082E4ED1ABABED5711027BBBDDD35B&cid=2D9C75573FA3E416&jid=DFE7B94EB76B8F26135C9890832CEF6A&aid=DF84D217BBDF7CADA8CF75A732616E3D&yid=9377ED8094509821&vid=6209D9E8050195F5&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=42425781F0B1C26E&eid=ECE8E54D6034F642&journal_id=1000-3096&journal_name=海洋科学&referenced_num=0&reference_num=16