%0 Journal Article
%T Expressing the tdh gene of Vibrio parahaemolyticus in Pichia pastoris and its hemolysis activity<br>副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测
%A ZHAO Yong-gang
%A ZHAN Wen-bin
%A SAREN Gao-w
%A WANG Jun-wei
%A WANG Zhi-liang
%A <br>赵永刚
%A 战文斌
%A 萨仁高娃
%A 王君玮
%A 王志亮
%J 海洋科学
%D 2010
%I 
%X 通过PCR 技术从副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus, VP)基因组DNA 上扩增耐热溶血素基因tdh, 双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA 中, 构建重组表达质粒pPICZaA-tdh, 经限制性内切酶SacI 线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)GS115, 经PCR 和测序鉴定耐热溶血素基因成功整合到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行 tdh 的表达, SDS-PAGE 分析证明重组 TDH(thermostable direct hemolysin, TDH) 的分子质量约为23 ku, 经 Western blotting 鉴定VP 抗体能与表达的 TDH 发生特异反应, 说明 tdh 基因在毕赤酵母中的表达是准确的。溶血实验证明了表达的TDH 具有溶血活性。本研究首次应用毕赤酵母表达耐热溶血素基因 tdh, 在培养基中获得分泌表达的耐热溶血素, 为研究tdh 基因的功能奠定了基础。
%K Thenmostable direct hemolysin
%K Secretory expression
%K Pichia pastoris
%K Hemolysis<br>耐热溶血素
%K 分泌表达
%K 毕赤酵母
%K 溶血活性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=E62459D214FD64A3C8082E4ED1ABABED5711027BBBDDD35B&cid=2D9C75573FA3E416&jid=DFE7B94EB76B8F26135C9890832CEF6A&aid=1B89D6093095904A59FC890C0486890D&yid=140ECF96957D60B2&vid=339D79302DF62549&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=F3090AE9B60B7ED1&eid=F3583C8E78166B9E&journal_id=1000-3096&journal_name=海洋科学&referenced_num=0&reference_num=0