%0 Journal Article
%T Establishment and optimization of an ISSR-PCR reaction system for Crassostrea hongkongensis<br>香港巨牡蛎ISSR-PCR 反应体系的建立及优化
%A LI Xiao-zheng
%A TONG Gui-xiang
%A WEI Xin-xian
%A WU Xiang-qing
%A Chen Kang
%A <br>黎小正
%A 童桂香
%A 韦信贤
%A 吴祥庆
%A 陈 康
%J 海洋科学
%D 2011
%I 
%X 以香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)基因组DNA为模板, 采用正交设计及单因素比较试验,分别对Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA 聚合酶和DNA 模板浓度的PCR 原料进行优化, 并通过温度梯度PCR, 筛选适宜的退火温度。确立了香港巨牡蛎的最适ISSR-PCR 反应体系: 25 μL 反应体系中含PCR1×Buffer, 2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.2 μmol/L 引物、1.2 U Taq DNA 聚合酶、20 ng DNA模板。反应程序为: 94℃预变性5 min; 94℃变性1 min, 48～54℃(随引物而确定)退火1 min, 72℃延伸1.5 min, 35 个循环; 72℃延伸10 min。利用所建立的 ISSR-PCR 反应体系对香港巨牡蛎基因组DNA 进行扩增, 获得了清晰、重复性好、多态性高的DNA 谱带, 为进一步利用ISSR 分子标记研究香港巨牡蛎的遗传多样性奠定了基础。
%K Crassostrea hongkongensis
%K ISSR-PCR
%K reaction system optimization<br>香港巨牡蛎(Crassostrea
%K )
%K ISSR-PCR
%K 体系优化
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=E62459D214FD64A3C8082E4ED1ABABED5711027BBBDDD35B&cid=2D9C75573FA3E416&jid=DFE7B94EB76B8F26135C9890832CEF6A&aid=180331A3F8050AB4C5E5A2BDB857CE20&yid=9377ED8094509821&iid=5D311CA918CA9A03&sid=13553B2D12F347E8&eid=B91E8C6D6FE990DB&journal_id=1000-3096&journal_name=海洋科学&referenced_num=0&reference_num=0