%0 Journal Article %T Rapid Detection of Rotavirus in Water Samples Using Immunomagnetic Separation Combined with Real Time PCR
免疫磁珠分离与实时定量PCR技术联合检测水中轮状病毒的研究 %A YANG Wan %A HE Miao %A LI Dan %A SHI Han-chang %A LIU Li %A
杨万 %A 何苗 %A 李丹 %A 施汉昌 %A 刘丽 %J 环境科学 %D 2009 %I %X 建立了一种免疫磁珠分离技术联合实时定量PCR快速定量检测水中轮状病毒的方法.通过制备能够分离水中轮状病毒的特异免疫磁珠,优化分离条件,建立了免疫磁珠分离前处理方法,并与逆转录、实时定量PCR结合,成功用于水中轮状病毒的检测.研究发现,在1 mL水样中加入10 μL轮状病毒免疫磁珠、0.25 μL Tween 20、孵育2 h可达到较好的分离效果;免疫磁珠可用于3%牛肉浸膏等常用病毒洗脱液中的轮状病毒的分离,表明该分离技术能与已有的病毒浓集方法良好地整合.免疫磁珠分离技术与实时定量PCR联合用于检测水中轮状病毒,全过程需时约5 h,检测限为1×104 copies/mL(相当于3~4 PFU/mL),检测结果与细胞病变试验检测结果有良好的线性相关关系(R2=0.981 6),表明其能较好地表征水样的病毒感染风险.对接种已知量的轮状病毒的污水处理厂二级出水、再生水、地表水、自来水等水样的实验表明,该法可用于各种水样中轮状病毒的检测. %K immunomagnetic separation %K real time polymerase chain reaction %K rotavirus %K water samples
免疫磁珠分离前处理 %K 实时定量PCR %K 轮状病毒 %K 环境水样 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=3FF3ABA7486768130C3FF830376F43B398E0C97F0FF2DD53&cid=A7CA601309F5FED03C078BCE383971DC&jid=64CD0AA99DD39F69401C615B85F123EF&aid=9E688804CE37E1CFA3EB183A1766F393&yid=DE12191FBD62783C&vid=340AC2BF8E7AB4FD&iid=94C357A881DFC066&sid=5A64531D29896B77&eid=A9251EF312FA9D67&journal_id=0250-3301&journal_name=环境科学&referenced_num=2&reference_num=26