%0 Journal Article
%T Construction of Recombinate Luminescence Bacteria Vector to Evaluate the Genetoxic of Environment Pollutant<br>用于环境污染物遗传毒性评价的重组发光细菌载体的构建
%A HUANG Xin-xin
%A HE Miao
%A SHI Han-chang
%A CAI Qiang
%A <br>黄新新
%A 何苗
%A 施汉昌
%A 蔡强
%J 环境科学
%D 2008
%I 
%X 基因重组发光菌在水质毒性的评价中具有重要的作用，本研究从污染物遗传毒性损伤的机制出发，构建2种遗传毒性新型基因重组发光菌载体PUCD-uvrA、PUCD-alkA.用PCR法从大肠杆菌W3110中扩增uvrA、alkA基因，将其与pGEM-T easy载体连接后测序.测序正确的uvrA、alkA片段及PUCD615载体均用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ双酶切，连接后电转化导入宿主菌JM109.挑取克隆，提取质粒用PCR鉴定，阳性克隆再进行测序.结果表明，uvrA、alkA基因PCR扩增出的片段为237　bp、326　bp，测序结果与GenBank中uvrA、alkA序列进行BLAST比对，同源性均为99％，表明扩增序列正确.与PUCD615载体连接后的测序结果表明，uvrA、alkA基因已正确地插入到PUCD615的多克隆位点，方向和读码框正确，2种载体构建成功.通过优化连接及转化条件，可将大片段的PUCD615载体与短片段的插入序列连接成功，构成重组载体.
%K 重组发光菌
%K 遗传毒性
%K PUCD-uvrA、PUCD-alkA载体
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=3FF3ABA7486768130C3FF830376F43B398E0C97F0FF2DD53&cid=A7CA601309F5FED03C078BCE383971DC&jid=64CD0AA99DD39F69401C615B85F123EF&aid=857A2EEA94406715B0A6B4FB0669ABA4&yid=67289AFF6305E306&vid=771469D9D58C34FF&iid=708DD6B15D2464E8&sid=5B040EA8C4FE09CA&eid=BEFEF55A1BF6A334&journal_id=0250-3301&journal_name=环境科学&referenced_num=2&reference_num=13