%0 Journal Article
%T AN ALKALINE LIPASE FROM YARROWIA LIPOLYTICA BOHAISEA-9145: GENE CLONING, HETEROLOGOUS EXPRESSION, AND CHARACTERIZATION<br>Bohaisea-9145海洋耶氏酵母碱性脂肪酶基因的克隆、异源表达和重组酶酶学性质
%A LI Zhong-Lei
%A WANG Yue-Jun
%A SHENG Jun
%A LIU Jun-Zhong
%A SUN Mi
%A <br>李忠磊
%A 王跃军
%A 盛 军
%A 刘均忠
%A 孙 谧
%J 海洋与湖沼
%D 2012
%I 
%X 采用基因重组和分子生物学相关技术, 对Yarrowia lipolytica Bohaisea-9145海洋低温碱性脂肪酶(Y. lipolytica Bohaisea-9145, LipYp)基因lipYp (1116bp)克隆并在Pichia pastoris中进行了异源真核表达研究。通过MD和MM平板及PCR扩增, 筛选和鉴定了重组子。结果表明, 阳性重组子经摇瓶发酵54h后上清液酶活力达到1956U/ml。发酵液经两步纯化得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶。实验同时研究了不同反应温度、pH值对重组LipYp活力和稳定性的影响, 结果显示重组LipYp最适反应温度和pH分别为35℃和8.5, 在pH 7.0—10.5之间以及45℃以下有较好稳定性。另外, 重组脂肪酶对中长链对硝基苯基酯类和甘油三酯类(C10—C12)有较强的水解能力。
%K Yarrowia lipolytica Bohaisea-9145
%K Pichia pastoris GS115
%K Gene clone
%K Heterologous expression
%K Characterization<br>Y.
%K Bohaisea-9145
%K 毕赤酵母GS115
%K 基因克隆
%K 异源表达
%K 性质
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=E62459D214FD64A3C8082E4ED1ABABED5711027BBBDDD35B&cid=2D9C75573FA3E416&jid=10F18692CD69EACA2DF7FC109993D35C&aid=115D7742A99E5C95B2BB0999DACC8600&yid=99E9153A83D4CB11&vid=BE33CC7147FEFCA4&iid=0B39A22176CE99FB&sid=D6354F61445E9456&eid=FBCA02DBD05BD4EA&journal_id=0029-814X&journal_name=海洋与湖沼&referenced_num=0&reference_num=0