%0 Journal Article
%T CONSTRUCTION OF cDNA LIBRARY WITH TEGILLARCA GRANOSA MUSCULAR TISSUE AND SEQUENCE ANALYSIS OF FERRITIN GENE<br>泥蚶(Tegillarca granosa) cDNA 文库的构建及铁结合蛋白基因(Ferritin)序列分析
%A HE Jing-Jing
%A LI Ye
%A LI Tai-Wu
%A SU Xiu-Rong
%A WANG Meng-Qian
%A LI Song-Wei
%A ZHOU Jun
%A MA Bin
%A LI Qiang-Fang
%A <br>贺静静
%A 李晔
%A 李太武
%A 苏秀榕
%A 王孟前
%A 李松伟
%A 周军
%A 马斌
%A 李强芳
%J 海洋与湖沼
%D 2009
%I 
%X 取正常泥蚶肌肉组织获得总RNA，纯化mRNA后，利用含SfiⅠ酶切位点的CDSⅢ引物逆转录合成cDNA第一链，通过LD—PCR合成cDNA双链，经胶回收除去短片段，与pDNR—LIB载体进行连接，电转化到大肠杆菌DH10B中，构建形成原始文库，进行滴度测试和重组率鉴定。结果表明原始文库的滴度为3．17&#215;10^5cfu／ml，重组率为86．3％，插入片段多在500--2500bp间。随机挑选458个克隆测序，经分析获得94种已知基因及87种未知基因。其中包括铁结合蛋白（Ferritin）的全长cDNA序列。该基因序列全长895bp，5’-端非编码区为163bp，3’-非编码区为213bp，开放阅读框为519bp，编码172个氨基酸。推测其蛋白分子量和等电点分别为20kDa和4．89。氨基酸序列与皱纹盘鲍、太平洋牡蛎、血红扇头蜱、文昌鱼、中华蟾蜍、非洲爪蟾、小家鼠以及人等的同源性有62％-82％。比对结果表明，铁结合蛋白基因在动物进化中高度保守。
%K cDNA library
%K Sequence analysis
%K Tegillarca granosa
%K Ferritin gene<br>cDNA文库
%K 序列分析
%K 泥蚶
%K 铁结合蛋白基因
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=E62459D214FD64A3C8082E4ED1ABABED5711027BBBDDD35B&cid=2D9C75573FA3E416&jid=10F18692CD69EACA2DF7FC109993D35C&aid=D20E1952B1C8480BF9C2CA06D4843C2F&yid=DE12191FBD62783C&vid=1371F55DA51B6E64&iid=38B194292C032A66&sid=F50A8B5513721E1C&eid=AF507FDD66D991DA&journal_id=0029-814X&journal_name=海洋与湖沼&referenced_num=0&reference_num=28