%0 Journal Article %T 猪分离卵泡体外培养过程中Fas/FasL对颗粒细胞凋亡的作用 %A 林鹏飞 %A 郝元斌 %A 郭慧利 %A 刘红林 %A 芮 荣 %J 动物学研究 %D 2010 %I Chinese Academy of Sciences %X 从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为3类:健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡。猪分离卵泡经眼观检查后再行石蜡切片和HE染色,形态学研究表明,眼观检查对于健康卵泡的判定准确率为92%。取健康卵泡按直径大小分为3组:直径>5 mm大卵泡组、3~5 mm中卵泡组和≤3 mm小卵泡组。卵泡培养8、16和24 h,以Annexin-V FITC/PI双染流式细胞仪检测壁层颗粒细胞凋亡情况,结果发现培养卵泡颗粒细胞的总凋亡率(早期凋亡+晚期凋亡)在8 h时就已达到70%以上,至24 h则为81.1%~94.6%。收集无血清培养0、8、16、24、48和72 h的卵泡颗粒细胞,用real time PCR SYBRgreen法检测各组卵泡颗粒细胞FasL和Fas mRNA相对表达量。各级卵泡颗粒细胞中FasL mRNA水平随培养时间显著增加,培养至24 h达最大值(P<0.05);小卵泡颗粒细胞FasL mRNA水平均高于大、中卵泡组。各级卵泡颗粒细胞Fas mRNA相对表达量在培养前(0 h)差异不显著,8 h时显著增加,48 h达最大值。该实验表明,所用无血清卵泡培养体系可有效诱导卵泡颗粒细胞的凋亡,细胞凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,但卵泡闭锁程度可因卵泡大小而异,小卵泡似乎更容易发生闭锁。 %K 猪 %K 有腔卵泡 %K 颗粒细胞 %K 凋亡 %K Fas/FasL %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=7C502F1A6798ACE1B8C57E291C48C7F1&aid=B2A2E1A43F832C6F3C5A6489C10375F4&yid=140ECF96957D60B2&vid=4AD960B5AD2D111A&iid=38B194292C032A66&sid=DC330B09A33F1455&eid=6826CBE9C80ACB20&journal_id=0254-5853&journal_name=动物学研究&referenced_num=0&reference_num=20