%0 Journal Article %T Effect of DNA Methylation onIgf-2r Expression in the Development of Cloned Cattle
甲基化对牛Igf-2r表达的影响及其在克隆牛发育中的作用 %A 蔡霞 %A 龙健儿 %J 动物学研究 %D 2007 %I Chinese Academy of Sciences %X 摘要:目的目前认为克隆效率低的主要原因是供体核的不完全重编程(reprogramming)导致在发育过程中一些重要的基因异常表达。本文主要研究表观遗传结构对Igf-2r表达的影响及其在克隆牛发育过程中的作用。方法 首先,运用DNA甲基化转移酶抑制剂5'-脱氧胞苷(5'-azacytidine,5'-AzaC)处理MDBK细胞(牛肾上皮细胞),并通过实时荧光定量PCR方法对Igf-2r基因的表达进行定量分析。在此基础上,应用亚硫酸盐甲基化测序法检测5头克隆牛及1头正常牛脑、肺、心、肝组织Igf-2r印迹调控区DMR 2(DNA differentially methylated region,DMR)及非印迹调控区3'-UTR(3'-untranslated region,UTR)的DNA甲基化水平。结果 5'-aza处理MDBK细胞后,Igf-2r基因的表达上调。正常牛各组织中Igf-2r DMR 2区的DNA甲基化程度差异较大,3'-UTR区较稳定;与正常牛相比,克隆牛DMR 2区的甲基化程度变化较大,3'-UTR区无显著性变化。结论 DNA甲基化修饰影响Igf-2r基因的表达。正常牛不同组织中Igf-2r基因DMR 2区的DNA甲基化程度不同,提示Igf-2r基因的印迹调控方式在不同组织中可能不同。克隆牛发育过程中,调控Igf-2r基因印迹的DMR 2表观结构被明显改变,而非印迹调控区3'-UTR则无明显变化,提示Igf-2r基因印迹调控区被破坏,很可能是导致克隆牛发育异常的一个重要原因。关键词:Igf-2r,表观遗传结构,克隆牛,DNA甲基化,基因印迹 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=7C502F1A6798ACE1B8C57E291C48C7F1&aid=E725E048DDC028FFAF2C5C1540F78463&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=94C357A881DFC066&sid=47F7649551A37CFC&eid=DA4893B5F9885621&journal_id=0254-5853&journal_name=动物学研究&referenced_num=0&reference_num=0