%0 Journal Article
%T Construction of a human liver carcinoma cell line that stable expression of HBV with gene trap vector<br>利用基因捕获技术建立稳定表达HBV的细胞模型
%A HE Yun-yan
%A TAN Chang
%A LI Yi
%A HUANG Ai-long
%A TANG Hua
%A <br>何云燕
%A 谭畅
%A 李毅
%A 黄爱龙
%A 汤华
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%I 
%X pGEM-HBV1.3质粒经HindIII限制性内切酶消化,将HBV1.3全长DNA切下,与同样经HindIII限制性内切酶降解过的PU21连接,得到PU21-HBV重组质粒。将该重组质粒采用电击转染方法导入HepG2细胞中,G418筛选阳性克隆并以X-gal染色,RT-PCR、Southernblot等方法验证HBVDNA的插入和表达。PU21-HBV重组质粒经测序证明HBV1.3全长DNA正确与PU21载体连接,该重组质粒转染HepG2细胞后经G418筛选,得到一系列阳性克隆,Southernblot证实HepG2细胞基因组中含HBVDNA,RT-PCR结果表明HBVDNA在HepG2细胞中有功能基因的转录。HBV1.3已被整合在HepG2细胞染色体中并能稳定表达其RNA。稳定的HBV表达细胞模型构建成功。HBV表达细胞模型的建立,为进一步研究相关基因对HBV的转录、复制、转录后调节以及HBV各种蛋白的表达机理研究提供实验材料。
%K PU21 gene trapping vector HBV Expression<br>PU21基因捕获载体
%K 乙型肝炎病毒(HBV)
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=7280658087A9FB17&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=0B39A22176CE99FB&sid=B91E8C6D6FE990DB&eid=D3E34374A0D77D7F&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=9