%0 Journal Article
%T The Recombinant Expression and Receptor-binding Activity of the B Subunit of Shiga-like Toxin Type Ⅱ<br>Ⅱ型志贺样毒素B亚单位的重组表达及其受体结合活性
%A BAO Shi-zhong
%A SHI Jing
%A CAI Kun
%A YIN Jun
%A WANG Hui
%A <br>包士中
%A 史晶
%A 蔡昆
%A 荫俊
%A 王慧
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I 
%X 目的：在大肠杆菌中重组表达Ⅱ型志贺样毒素B亚单位（Stx2B），并对其表达形式和受体结合活性进行分析。方法：PCR方法从肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7中钓取Stx2B编码基因，利用基因克隆技术构建重组大肠杆菌pET-stx2B／BL21，IPTG诱导目的蛋白高效表达并对表达的包涵体进行变性和复性处理，离子交换层析纯化蛋白。通过SDS—PAGE变性和非变形蛋白电泳，分析重组Stx2B的表达形式，并利用Hela细胞结合模型，评价重组StX2B与细胞受体的结合活性。结果：构建的重组大肠杆菌pET-stx2B／BL21能高效表达Stx2B，经变性、复性及离子交换层析操作，获得高纯度的目的蛋白。SDS—PAGE变性和非变形蛋白电泳分析显示，重组Stx2B以二聚体形式存在，单体之间通过二硫键相连。细胞结合试验显示，重组Stx2B与Hela细胞具有特异结合活性。结论：成功构建表达Stx2B的基因工程菌，Stx2B的受体结合活性不依赖于五聚体形式。
%K Ⅱ型志贺样毒素B亚单位
%K 重组表达
%K 受体结合活性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=2531C11D3CC8989629A16FACC45F0F81&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=EA389574707BDED3&eid=C5154311167311FE&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=8