%0 Journal Article
%T Cloning and expression of a fragment of swine HEV ORF2 AG02 in E.coli and the Development of Indirect ELISA with<br>猪戊型肝炎病毒基因ORF2片段AG02的融合表达及间接ELISA方法的初步建立
%A ZHANG Ke-xin
%A ZHAO Min
%A GUO Wei
%A YU Min
%A ZHAO Yu-jun
%A XIANG Wen-hua
%A <br>张可心
%A 赵敏
%A 郭巍
%A 于敏
%A 赵宇军
%A 相文华
%J 中国生物工程杂志
%D 2006
%I 
%X 采用巢式RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(SHEV)结构蛋白基因ORF2部分片段AG02。将该片段插入pET32a表达载体,命名为PET-HEV,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE-3),经1mmol/LIPTG诱导得到表达,进行SDS-PAGE分析,证明该片段得到融合表达,分子量为33kDa。Westernblot分析表明,重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。以纯化的重组蛋白建立了初步的间接ELISA方法,经方阵滴定确定最佳包被浓度为2.43μg/ml,血清最佳的稀释比为1∶40。建立的ELISA方法有较高的特异性和敏感性。
%K HEV ORF2 Pronucleus expression Indirected ELISA<br>戊型肝炎病毒
%K ORF2片段
%K 原核表达
%K 间接ELISA
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=12B02979CDCC3CF4&yid=37904DC365DD7266&vid=96C778EE049EE47D&iid=5D311CA918CA9A03&sid=42425781F0B1C26E&eid=2001E0D53B7B80EC&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=9