%0 Journal Article
%T Establishment of the Huntington''s Disease in vitro Drug Screening Cell Model<br>一种亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型的建立
%A WANG Ai-e
%A ZHANG Sui-yang
%A YU Xin-rong
%A WANG Dong-xia
%A WANG Ying
%A MA Jian-xin
%A MEI Kai-cheng
%A YAN Chun-lian
%A <br>王爱娥
%A 张睢扬
%A 于新荣
%A 王东霞
%A 王英
%A 马建新
%A 梅开城
%A 闫春莲
%J 中国生物工程杂志
%D 2006
%I 
%X 为建立以多聚谷氨酰胺(polyQ)为靶点的亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型,以随机引物PCR法克隆了不同长度的CAG片段,经序列测定正确后,分别融合到已经建立的氯霉素抗性融合蛋白表达系统pCAR中CAT的N端。重组质粒转化大肠杆菌,并在其中诱导表达,SDS-PAGE和氯霉素抗性平板试验对目的蛋白可溶性与氯霉素活性进行测定。结果显示长度在40以上的polyQ为不溶性包涵体表达,表现为低水平的氯霉素抗性,40以下的polyQ则以可溶形式表达,表现为高水平氯霉素抗性,从而建立起能够模拟亨廷顿舞蹈症病理过程的体外细胞模型。通过检测模型细胞的氯霉素抗性,可以定性、定量地反映polyQ在体内的折叠状态和可溶性,故可以借助该模型对促溶药物或生物活性物质进行高通量筛选,为亨廷顿舞蹈症预防、诊断、治疗提供了新思路。
%K polyglutamine (polyQ)
%K Huntington's disease (HD)
%K protein solubility
%K chloramphenicol acetyltransferase (CAT)
%K cell model<br>多聚谷氨酰胺(polyQ)
%K 亨廷顿舞蹈症(HD)
%K 蛋白溶解性
%K 氯霉素乙酰基转移酶
%K 细胞模型
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=C343C2BB812F138B&yid=37904DC365DD7266&vid=96C778EE049EE47D&iid=F3090AE9B60B7ED1&sid=13553B2D12F347E8&eid=EA389574707BDED3&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=10