%0 Journal Article %T Gene Expression Efficiency of Antheraea Pernyi Nucleopolyhedrovirus Vector in Both an Established Cell Line and Diapausing Pupae
柞蚕核型多角体病毒载体在培养细胞和休眠蛹中的基因表达效果 %A HUANG Yuan-jiao %A WANG Xian-yu %A WANG Xue-ying %A XUAN Chao %A JIANG He-sheng %A KOBAYASHI Jun %A
黄元姣 %A 王先裕 %A 王学英 %A 臧宁 %A 蒋和生 %A 小林淳 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %I %X 柞蚕核型多角体病毒(AnpeNPV)作为基因表达载体在柞蚕培养细胞(AnPe细胞)和柞蚕蛹中已经成功地表达出了外来基因,并生产出了大量蛋白质.比较了AnpeNPV与苜蓿尺蠖核型多角体病毒(AcMNPV)、家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和美国白蛾核型多角体病毒(HycuNPV)基因表达载体在培养细胞和昆虫活体组织内的β-半乳糖苷酶基因表达效果.结果显示,5×105个细胞中β-半乳糖苷酶的最高酶活性分别是AnpeNPV在AnPe细胞为40.9 units/ml (TC-100培养液,FBS10%)和59.9 units/ml(SF-900Ⅱ培养液),AcMNPV在Sf9细胞为72.4 units/ml(TC-100,FBS10%)和66.4 units/ml(SF-900Ⅱ)、在High5细胞为326 units/ml(EX-CELL 405培养液),BmNPV在Bm4细胞为15.1 units/ml(TC-100,FBS10%),HycuNPV在SpIm细胞为68.6 units/ml(SF-900Ⅱ).活体组织内β-半乳糖苷酶的最高酶活性分别是柞蚕雌蛹为14.3 units/g、雄蛹为11.7 units/g,家蚕幼虫是10.1 units/g.实验证明AnpeNPV/AnPe的外来基因表达水平与AcMNPV/ Sf9和HycuNPV/SpIm相似、比BmNPV/ Bm4高、不及AcMNPV/ High5;AnpeNPV/柞蚕蛹,其雌蛹比BmNPV/家蚕5龄幼虫的外来基因表达效果好、雄蛹与之无明显差异,说明AnpeNPV基因表达载体无论是在培养细胞还是昆虫活体组织中均可与其他NPV基因表达载体相媲美.柞蚕蛹由于可以机械化、大规模地操作,对于大量生产蛋白质具有更好的应用前景. %K Nucleopolyhedrovirus %K Vector %K Antheraea pernyi %K Gene Expression
核型多角体病毒 %K 载体 %K 柞蚕 %K 基因表达 %K 柞蚕 %K 核型 %K 多角体病 %K 毒载体 %K 培养细胞 %K 休眠 %K 基因表达水平 %K 表达效果 %K Pupae %K Cell %K Line %K Established %K Vector %K Antheraea %K pernyi %K Efficiency %K Expression %K 前景 %K 应用 %K 大量生产 %K 操作 %K 大规模 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=56B45B300171853B2FFF0E00BF349FBB&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=38B194292C032A66&sid=FC0714F8D2EB605D&eid=2A8D03AD8076A2E3&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=16