%0 Journal Article
%T Preparation and Cytototic Activity Assay of Recombinant Chimeric Toxin GnRH-PEⅡ-luffinS<br>GnRH-PEⅡ-luffinS重组嵌合毒素的制备与细胞毒性检测
%A LIU Yan-hua
%A GAO Shan
%A KANG Lin
%A WANG Jun-hong
%A ZHAO Jin-yin
%A GAO Yan-li
%A HU Rui
%A Wang Jing-lin
%A <br>刘艳华
%A 高姗
%A 康琳
%A 王俊红
%A 赵金银
%A 高艳丽
%A 胡瑞
%A 王景林
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I 
%X 目的:制备以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH Ⅰ)为导向部分,以绿脓杆菌外毒素的结构域Ⅱ(PEⅡ)为转膜区,以丝瓜毒素luffinS2为毒性部分的重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS,体外实验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:重叠PCR法扩增GnRH-PEⅡ-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化.纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa,A549,HepG-2,SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒作用.结果:成功构建了GnRH-PEⅡ-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为94%.GnRH-PEⅡ-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为13.50μg/ml,13.74μg/ml,16.79μg/ml和26.07μg/ml,而对CEF无作用.结论:重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS对肿瘤细胞有较强的杀伤作用.
%K Ⅰ型促性腺激素释放激素
%K 绿脓杆菌外毒素结构域Ⅱ
%K 丝瓜毒素
%K 重组嵌合毒素细胞毒性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=A89A1562D12D0C46D30D6BBD6A9EAFF9&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=D997634CFE9B6321&eid=987EDA49D8A7A635&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=22