%0 Journal Article %T Alpha 1抗胰蛋白酶核基质附着区增强RNA聚合酶Ⅱ依赖的转录 %A 李志艳 %A 张涌 %J 中国生物工程杂志 %D 2007 %I %X 核基质附着区是一种真核生物的DNA元件,能调控染色体结构和活性。为研究体内MAR相关的染色质准入和转录调控,从人基因组中克隆了Alpha1抗胰蛋白酶核基质附着区(α1-ATMAR)并将其连入pEGFP-C1载体。分别以空载体和携带MAR的载体通过脂质体法转染人胚肾293细胞系。经G418筛选20天的细胞池用作实验分析。半定量RT-PCR及荧光显微镜观察显示此MAR能够增强临近基因的表达。进一步用染色质免疫共沉淀(ChIP)共定位CMV启动子和RNA聚合酶Ⅱ(RNAPⅡ),PCR结果显示存在MAR元件时,更多的RNA聚合酶Ⅱ被富集到启动子区。ChIP方法可用于证实MAR介导的转录激活,在实时检测方面比RT-PCR提供了更多动力学信息。这项技术为进一步研究基因表达调控提供了技术平台。 %K 核基质附着区 %K 染色质免疫共沉淀 %K 转录调控 %K RNA聚合酶Ⅱ %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=1D49C3C592AFC4C0&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=E158A972A605785F&sid=7C3A4C1EE6A45749&eid=BE33CC7147FEFCA4&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=22