%0 Journal Article
%T Construction of OTX1 lentiviral vector and overexpression research<br>OTX1基因慢病毒载体的构建及过表达研究
%A REN Ping
%A WANG Shu-yan
%A GUAN Yun-qian
%A XU Yan-ling
%A ZHANG Yu
%A <br>任萍
%A 王淑艳
%A 关云谦
%A 徐艳玲
%A 张愚
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%I 
%X OTX1基因是神经发育调控中关键转录因子之一。实验构建表达OTX1基因慢病毒载体,探讨慢病毒介导OTX1基因体外过表达的可行性。将OTX1基因克隆到慢病毒穿梭质粒DUET101内,构建表达OTX1以及GFP-OTX1基因的慢病毒载体;将pDUET-OTX1、pDUET-GFP-OTX1及pDUET101(空载体对照)质粒分别与慢病毒包装质粒pCMVΔR8.91、pMD.G共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带OTX1基因、GFP-OTX1基因的重组慢病毒DUET-OTX1、DUET-GFP-OTX1以及仅携带GFP基因的DUET-GFP;用重组慢病毒分别转导293T细胞、SY5Y细胞、小鼠胚胎干细胞及大鼠胚胎15天皮层神经干细胞,证实慢病毒载体能够将外源基因转导入不同细胞,且转导的OTX1或GFP-OTX1在不同细胞中均仅在细胞核内表达;培养OTX1单克隆抗体细胞,浓缩抗体上清,通过Westernblot以及细胞免疫荧光法证实慢病毒介导的OTX1基因及GFP-OTX1基因转导入293T细胞后的过表达。证实了慢病毒载体是高效的基因转移载体;OTX1作为发育过程中至关重要的转录因子,经过重组慢病毒体外转导后均只在细胞核内表达。
%K 慢病毒
%K OTX转录因子
%K 基因表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=F74689F264F67EFB&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=7801E6FC5AE9020C&eid=659D3B06EBF534A7&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=11