%0 Journal Article
%T Molecular Cloning, Prokaryotic Expression and Biological Activity of α-2,6 Sialyltransferase<br>α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gal1)的cDNA克隆、原核表达及生物活性研究
%A HOU Xiao-Qiang Xian-Zhu XIA
%A <br>侯小强
%A 高玉伟
%A 孙培录
%A 冯娜
%A 夏咸柱
%A 杨松涛
%A 段德明
%J 中国生物工程杂志
%D 2009
%I 
%X 克隆载体中,经序列测定后与 GenBank 中报道的已知序列比对完全一致,再将已知目的序列插入原核表达载体pET-28α(+)中.将构建正确的原核表达载体转化表达受体菌BL21(DE3)中,IPTG诱导其进行表达并鉴定目的蛋白,对鉴定正确的目的蛋白复性后经Ni2+亲和层析柱纯化获得高纯度的α-2,6 唾液酸转移酶蛋白.然后用霍乱弧菌神经氨酸酶处理健康鸡红细胞,清除鸡红细胞表面所有类型的唾液酸寡糖链;再用表达的α-2,6 唾液酸转移酶以CMP-唾液酸作为底物在霍乱弧菌神经氨酸酶处理的鸡红细胞表面标记上SAα2,6 Gal受体.将标记有SAα2,6Gal受体的鸡红细胞应用微量血凝试验和流式细胞仪进行检测,以验证所表达蛋白的生物活性.结果表明,原核表达的α-2,6唾液酸转移酶具有较好的生物活性.
%K 6<br>α-2
%K 唾液酸转移酶
%K 原核表达
%K 生物特性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=36698847F3BD912AC6101F3939C38FD5&yid=DE12191FBD62783C&vid=771469D9D58C34FF&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=BCA2697F357F2001&eid=BC12EA701C895178&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=15