%0 Journal Article
%T Construction and expression of human sApo2L-Fc fusion protein in CHO cells<br>人sApo2L-Fc的分子构建及其在CHO细胞中的表达
%A NIU Xiao-xia
%A TIAN Ya-feng
%A LIU Jin-yi
%A WU Xiao-dong
%A <br>牛晓霞
%A 田雅峰
%A 刘金毅
%A 吴晓东
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I 
%X 目的:构建人sApo2L-Fc分子,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达有生物学活性的人Apo2L-Fc融合蛋白. 方法:将sApo2L-Fc基因克隆入pcDNA3.1( )表达载体,重组质粒转化大肠杆菌DH5α.挑取阳性克隆扩大培养,提取质粒进行酶切鉴定;采用脂质体法将重组质粒转入CHO细胞,经G418加压筛选、ELISA检测,挑选表达较高的阳性转化子扩大培养;表达的sApo2L-Fc融合蛋白经Protein A亲和柱纯化,纯化产物用SDS-PAGE,Western blotting检测样品的分子量及免疫原性,用L929细胞进行生物活性测定. 结果:酶切鉴定及测序显示重组子构建与预想一致;ELISA证实了sApo2L-Fc融合蛋白在CHO细胞中的表达;SDS-PAGE检测到纯化产物的分子量与理论分子量相符;在同样的位置,Western blotting显示阳性;L929细胞测定:纯化产物的生物学活性达1.0×105IU/mg. 结论:构建了sApo2L-Fc的表达载体,并成功地在CHO中表达,表达的sApo2L-Fc融合蛋白具有生物学活性.
%K sApo-2L
%K Fc-fusion protein
%K CHO cell
%K Eukaryotic expression systerm<br>sApo2L
%K Fc融合蛋白
%K CHO细胞
%K 真核表达系统
%K 分子构建
%K 细胞
%K 表达
%K CHO
%K Cells
%K Fusion
%K Protein
%K Human
%K Expression
%K 生物活性测定
%K 位置
%K 理论
%K 重组子
%K 显示
%K 测序
%K 结果
%K 免疫原性
%K 分子量
%K 样品
%K Western
%K blotting
%K 纯化产物
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=2505E69938D1DA058CCFB090D4027EF5&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=0B39A22176CE99FB&sid=659D3B06EBF534A7&eid=B91E8C6D6FE990DB&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=13