%0 Journal Article
%T Construction and expression in vitro of RU486-inducible regulatory vector<br>RU486诱导调控载体的构建及体外表达
%A CHEN Jian
%A XUE Xu-chao
%A FANG Gao-en
%A SU Chang-qing
%A QIAN Qi-jun
%A <br>陈坚
%A 薛绪潮
%A 方国恩
%A 苏长青
%A 钱其军
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%I 
%X 构建可经RU486诱导表达载体,并证实其对基因表达的调控作用。通过分子生物学技术,改造了含有GLP65反式作用调控因子和GAL4杂合启动子的PRS质粒。PCR扩增BGHpolyA片段,并引入需要的酶切位点。在GLP65调控区上游添加了hCMV启动子,在GAL4杂合启动子下游加入了荧光素酶报告基因。同时,为减少两个转录单元之间的潜在干扰,加入了1.2kb的小鸡β珠蛋白绝缘子。经PCR和限制性酶切及测序证实了载体的正确性。在体外转染HEK293细胞后,运用双荧光素酶报告基因技术鉴定了该系统的调控能力。加入诱导剂RU486后,可以诱导表达荧光素酶,并在一定范围内两者呈正比,最高可以实现荧光素酶的40余倍的表达,而没有RU486时,几乎没有报告基因的表达,表明RU486诱导调控载体构建成功,可实现对目的基因的表达时间和表达水平的精确调控,为进一步的基因调控研究和基因治疗提供了良好的工具。
%K RU486<br>诱导表达
%K 基因调控
%K 荧光素酶
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=C72BAF7185DBF9D5&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=B31275AF3241DB2D&sid=CA4FD0336C81A37A&eid=94C357A881DFC066&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=8