%0 Journal Article
%T Construction and Optimization of Fluorescently Labeled Multiplex-PCR<br>荧光标记复合PCR扩增微卫星位点的构建与优化
%A ZHU Ze-yuan
%A WANG Ya-ju
%A SHI Yong-hui
%A LE Guo-wei
%A <br>朱泽远
%A WANG Ya-ju
%A 施用晖
%A 乐国伟
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%I 
%X 采用毛细管电泳技术,构建并优化了荧光标记复合PCR同时扩增多个微卫星位点。根据设计所扩增微卫星位点的期望长度,将9个微卫星位点分成两组,5个位点用FAM(蓝色)标记,4个位点用HEX(绿色)标记;两种荧光类型分组优化,用琼脂糖胶电泳检测。荧光标记的复合PCR扩增8个中华绒螯蟹样品的9个微卫星位点,采用ABI3730xl毛细管电泳检测,以ROX500(红色)为长度标准物,结果经Genemapper3.5软件分析,检测结果表明毛细管电泳检测荧光标记复合PCR产物不仅精确读取微卫星位点的长度(分辨率高达1bp),还能区分微卫星位点复制时滑链所引起的"回声斑";调整各微卫星位点引物比例使所有位点扩增强弱均匀。逐一检测复合PCR基本参数(dNTP浓度、PCR程序和模板DNA用量)对复合PCR产物的影响,优化PCR。结果表明通过毛细管电泳检测荧光标记复合PCR产物来读取微卫星位点的基因型具有精确性、高效性和稳定性。
%K Capillary electrophoresis Multiplex-PCR Microsatellite<br>毛细管电泳
%K 复合PCR
%K 微卫星
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=06F0DDA8E96AEE23B7D75EC9D4135EFF&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=708DD6B15D2464E8&sid=1D0FA33DA02ABACD&eid=8BD23BD67BF01A5C&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=11