%0 Journal Article
%T Construction of Coagulant Factor VII Gene Expression Vector and Expression in BHK Cell Line<br>凝血因子VII基因表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达
%A LU Mao-min WANG Na WANG Dong YU Qun ZHANG Jin-gang
%A <br>吕茂民
%A 王娜
%A 王栋
%A 于群
%A 章金刚
%J 中国生物工程杂志
%D 2005
%I 
%X 凝血因子Ⅶ是凝血块形成的起始关键分子之一,它对外源性凝血途径的启动具有重要的作用。为表达具有促凝活性的重组人凝血因子Ⅶ,通过PCR的方法从质粒pUC-FⅦ中扩增人凝血因子ⅦcDNA,并将其定向克隆入真核表达载体pIRESneo中,构建重组表达载体pIRES-FⅦ,测序正确后用脂质体介导的方法转染BHK-21细胞,经G418加压筛选、细胞有限稀释等方法获得克隆细胞株,收集无皿清培养上清,进行SDS-PAGE、Western blot和活性鉴定。结果成功构建了重组表达载体pIRES-FⅦ,实现了其在BHK-21细胞中的表达,且表达产物具有促凝活性。重组人凝血因子Ⅶ在哺乳动物细胞中的成功表达,为整体止血剂的研究奠定了基础。
%K Recombinant human coagulant factor VVVVVVVVVVVVVVVVVII(rhF7777777777777777777777) BHK-21 cell line Expression<br>重组凝血因子Ⅶ
%K BHK-21
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=403F430086269FCB&yid=2DD7160C83D0ACED&vid=C5154311167311FE&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=1AE5323881A5ECDC&eid=F4B561950EE1D31A&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=1&reference_num=5