%0 Journal Article
%T Cloning and Expression of ywtD Gene from B.subtilis NX-2 and the Enzymatic Degradation of γ-Polyglutamic Acid<br>枯草杆菌NX-2聚谷氨酸解聚酶的克隆表达及其降解性质研究
%A JIN Jing
%A YAO Jun
%A XU Hong
%A XU Lin
%A <br>金晶
%A 姚俊
%A 徐虹
%A 许琳
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%I 
%X 利用PCR技术从γ-聚谷氨酸产生菌Bacillus subtilisNX-2的基因组DNA上扩增出聚谷氨酸内切解聚酶基因(ywtD),克隆后测序,对该基因编码区进行了序列分析,比对结果表明扩增的ywtD基因编码与文献报道的序列相似性为99.0%,碱基的差异均表现为碱基取代,仅有一个碱基取代导致编码氨基酸的变化,即第349位密码子由GCC变为GTC。将ywtD基因克隆入表达载体pET15b中,该载体转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经0.5mmol/LIPTG诱导,外源解聚酶蛋白获得高效表达。利用酶的初提液对聚谷氨酸进行降解,结果显示经72小时解聚酶作用后,γ-PGA分子量从700kDa降到20kDa,此后随作用时间的延长,聚谷氨酸分子量趋于定值。
%K 聚谷氨酸
%K 解聚酶
%K 枯草芽孢杆菌
%K 分子量
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=A7F9EBA723A8591B&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=DB817633AA4F79B9&iid=94C357A881DFC066&sid=339D79302DF62549&eid=16D8618C6164A3ED&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=14