%0 Journal Article
%T Isolation and Functional Analyse of Promoter of the rbcS Gene from Dunaliella salina<br>杜氏盐藻rbcS启动子的克隆和功能分析
%A CHAI Yu-rong
%A TIAN Fang
%A LIU Hong-tao
%A LI Jie
%A XUE Le-xun
%A <br>柴玉荣
%A 田芳
%A 刘红涛
%A 李杰
%A 薛乐勋
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I 
%X 为提高转基因盐藻的表达效率,利用基因组步行方法和巢式PCR,从盐藻中克隆了1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(rubisco)的小亚基基因rbcS的5'上游调控序列,并对其进行序列分析和转基因功能分析.采用Dra I、EcoR V、Pvu II和Stu I 4种平端限制内切酶分别酶切盐藻基因组DNA,并与接头连接,构建基因组步行文库GWL 1、GWL 2、GWL 3和GWL 4;设计特异引物从这4种文库中扩增rbcS基因的5'上游调控序列.在GWL 1、GWL 4中分别扩增出约1.2 kb的片段.对该序列的分析表明,它的3'端与已知盐藻rbcS cDNA 的5'端序列完全一致,说明是该基因的5'端上游区,并且包含多个与转录调控有关的保守序列(如TATA-box,CAAT-box),富含GT的重复序列.此序列EcoR I下游的片段与除草剂抗性基因bar相融合,构建表达载体,电击法转化盐藻.通过对转化藻株的抗性筛选以及PCR和Southern blot检测,表明该区域能驱动外源基因bar在转基因盐藻中的表达,推断是盐藻rbcS基因的启动子调控区.
%K Dunaliella salina
%K Ribulose-1
%K 5-bisphosphate carboxylase/ oxygenase
%K rbcS
%K Promoter<br>盐藻
%K 1
%K 5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶
%K rbcS
%K 启动子
%K 杜氏盐藻
%K rbcS
%K 启动
%K 克隆
%K 功能分析
%K Dunaliella
%K salina
%K Gene
%K Promoter
%K Analyse
%K Functional
%K 调控区
%K 表达载体
%K 外源基因
%K 驱动
%K 区域
%K 检测
%K Southern
%K blot
%K 抗性筛选
%K 转化
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=29E80DB6F9CA2CFF6AD0CC29388F7D8D&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=E158A972A605785F&sid=F4B561950EE1D31A&eid=286FB2D22CF8D013&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=16