%0 Journal Article
%T Secretory Expression of the Fusion Protein IFNβ-HSA in Pichia pastoris<br>人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达
%A LEI Jian-yong
%A ZHANG Lian-feng
%A YANG Jian-liang
%A JIN Jian
%A <br>雷楗勇
%A 张莲芬
%A 杨健良
%A 金坚
%J 中国生物工程杂志
%D 2006
%I 
%X 利用重叠PCR技术在体外拼接IFNB和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA。重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到高拷贝转化子。PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达的融合蛋白IFNB-HSA,表明该蛋白分子量约为90kDa,且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU／ml。
%K β干扰素
%K 巴斯德毕赤酵母
%K 融合蛋白
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=74ACE4AC8BFA2EC9&yid=37904DC365DD7266&vid=96C778EE049EE47D&iid=DF92D298D3FF1E6E&sid=FC0714F8D2EB605D&eid=13553B2D12F347E8&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=12&reference_num=10