%0 Journal Article
%T Cloning, Expression and Purification of SH2-SH2-SH3 Domain of Huamn PLC-γ1
人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的克隆、表达及纯化
%A JIN Yu-lian
%A JIN Ning-yi
%A XIANG Ze-ping
%A REN Yun-xia
%A Chen Qing-sen
%A
金玉莲
%A 金宁一
%A 项泽萍
%A 任云霞
%A 陈庆森
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I
%X 利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3 结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose )4B纯化得到高表达的重组蛋白.SDS-PAGE 和Western blot检测表明,PLC-γ1的SH2-SH2-SH3 结构域重组基因可在低温(33℃)条件下在E.coliBL21细胞中稳定完整表达,但是在较高温度下(37℃)会产生SH2-SH2-SH3 结构域不完全表达的现象.上述研究结果为人源性重组基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础.
%K 人源性PLC-γ1
%K SH2-SH2-SH3结构域
%K 基因克隆
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=74E1762F3031B501DC01085ED3EAD972&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=708DD6B15D2464E8&sid=9CF7A0430CBB2DFD&eid=FC0714F8D2EB605D&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=19