%0 Journal Article %T Cloning, Expression and Purification of SH2-SH2-SH3 Domain of Huamn PLC-γ1
人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的克隆、表达及纯化 %A JIN Yu-lian %A JIN Ning-yi %A XIANG Ze-ping %A REN Yun-xia %A Chen Qing-sen %A
金玉莲 %A 金宁一 %A 项泽萍 %A 任云霞 %A 陈庆森 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %I %X 利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3 结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose )4B纯化得到高表达的重组蛋白.SDS-PAGE 和Western blot检测表明,PLC-γ1的SH2-SH2-SH3 结构域重组基因可在低温(33℃)条件下在E.coliBL21细胞中稳定完整表达,但是在较高温度下(37℃)会产生SH2-SH2-SH3 结构域不完全表达的现象.上述研究结果为人源性重组基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3 结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础. %K 人源性PLC-γ1 %K SH2-SH2-SH3结构域 %K 基因克隆 %K 表达 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=74E1762F3031B501DC01085ED3EAD972&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=708DD6B15D2464E8&sid=9CF7A0430CBB2DFD&eid=FC0714F8D2EB605D&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=19