%0 Journal Article
%T Transformation of CryK13V gene into protoplasts of Trichoderma viride<br>CryK13V基因对绿色木霉原生质体的转化
%A LIU Shi-wang
%A GUO Ze-jian
%A JIANG Dong-hua
%A WANG Zheng-yi
%A <br>刘士旺
%A 郭泽建
%A 蒋冬花
%A 王政逸
%J 浙江大学学报(农业与生命科学版)
%D 2006
%I Zhejiang University Press
%X 将Cry基因的13位赖氨酸(K)突变成缬氨酸(V)的突变基因CryK13V,构建于pCSN43载体,完成绿色木霉转化载体pCSNTCCm的构建.在研究绿色木霉(Trichoderma viride)原生质体形成和再生基础上,初步研究了绿色木霉转化条件.结果表明,绿色木霉原生质体形成的合适条件为pH 6.98磷酸盐缓冲液加入4 mg·mL-1glucanex,培养24 h的菌丝,40 r·min-1振荡条件下30℃酶解4 h,原生质体产量达到4.7×107个·mg-1.原生质体在0.3 mol·L-1肌醇和0.3 mol·L-1KCl的CM培养基上再生率为14.5%.用限制酶XhoⅠ介导将带有潮霉素抗性标记的CryK13V基因转化到绿色木霉中,转化率为每微克DNA得到1～2个转化子,转化子稳定性和PCR鉴定结果表明,外源基因已转入受体菌绿色木霉中.
%K CryK13V基因
%K 绿色木霉
%K 原生质体转化
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=03F54A49DE00578AA0E5DDF5BC021AA7&cid=298920A27C9BAA22346FCA384240FAA4&jid=466C05D88593309B3EB5CF34361E6426&aid=67D5A717FA85800D&yid=37904DC365DD7266&vid=9971A5E270697F23&iid=38B194292C032A66&sid=B7BFA4B351E4C682&eid=7979125BBE749348&journal_id=1008-9209&journal_name=浙江大学学报(农业与生命科学版)&referenced_num=2&reference_num=12