%0 Journal Article %T Study on the expression conditions and primary purification of recombinant P450 BM-3 monooxygenase
重组细胞色素P450 BM-3酶的表达条件及初步纯化研究 %A HUANG Jun %A MEI Le-he %A ZHONG Chun-long %A DENG Fu-huang %A YAO Shan-jing %A
黄俊 %A 梅乐和 %A 钟春龙 %A 邓福华 %A 姚善泾 %J 浙江大学学报(农业与生命科学版) %D 2006 %I Zhejiang University Press %X 对重组细胞色素P450 BM-3基因工程菌的培养条件进行了单因素优化,确定了较佳的P450BM-3培养和表达条件接种量1%,装液量100 mL/500 mL,发酵培养基加入0.1 mg·L-1FeCl3,OD578达到1.0左右时升温至42℃诱导,诱导时间为5 h.考察了DEAE-Sepharose FF与Resource Q 2种阴离子介质对分离纯化P450 BM-3的影响.结果表明,Resource Q纯化效果优于DEAE-Sepharose FF,通过AKTA explorer100对Resource Q分离条件进行了优化,0.3 mol·L-1、0.5 mol·L-1的两步NaCl阶跃洗脱,P450 BM-3纯度较高,活性收率为30.1%,纯化倍数为2.12. %K 细胞色素P450 %K BM-3 %K 表达 %K 纯化 %K 离子交换层析 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=03F54A49DE00578AA0E5DDF5BC021AA7&cid=298920A27C9BAA22346FCA384240FAA4&jid=466C05D88593309B3EB5CF34361E6426&aid=D37F03074D7B33B7&yid=37904DC365DD7266&vid=9971A5E270697F23&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=6700D0D256586E73&eid=8C83C265AD318E34&journal_id=1008-9209&journal_name=浙江大学学报(农业与生命科学版)&referenced_num=0&reference_num=10