%0 Journal Article
%T 黑曲霉糖化酶cis调控区上两个CCAAT框协同参与基因启动子的转录激活作用
%A 朱兴国
%A H. M. Wang
%A 仇润祥
%A 刘丽
%A 董志扬
%A 唐国敏
%J 中国科学 生命科学
%D 2003
%I 
%X 已报道的EMSA和Footprinting试验表明黑曲霉Aspergillus niger T21糖化酶基因glaA启动子区-489～-414 bp及-390～-345 bp (分别简称为DC, PC)是与蛋白粗提液中同一蛋白因子结合, 并均含有CCAAT五核苷酸的序列. 对DC, PC在糖化酶表达调控中的作用进行了分析. 用CGTAA取代CCAAT, 获得突变体DCm, PCm, 两者均丧失体外结合蛋白因子的能力. 突变体的体内分析结果显示, DC和PC中任何一个发生突变或改变DC, PC在原启动子中的相对方向, 则启动子的活性下降到基础表达水平. 将多拷贝串联后的DC引入A. niger T21glaA启动子原位, 则内源糖化酶的表达和由该启动子引导的外源uidA基因的表达均发生下降, 但由构巢曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA引导的uidA的表达不受影响, 而且EMSA结果表明不等DC拷贝的A. niger转化子中DNA结合蛋白的含量没有明显变化, 表明多拷贝DC的引入引起了调控蛋白的滴定效应. 从A. niger T21cDNA中克隆到AngHapC基因, 将AngHapC基因引入上述含多拷贝DC而糖化酶低表达的A. niger菌株, AngHapC基因的表达使糖化酶的表达量得到明显回升. 上述结果表明, DC和PC中CCAAT五核苷酸序列为蛋白因子结合所必需, 而且两者必须同时与调控蛋白结合才能发挥促进转录的作用, AngHapC为与DC区域结合的正调节蛋白.
%K 黑曲霉糖化酶
%K 协同效应
%K 突变分析
%K CCAAT多拷贝
%K 滴定效应
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=DEEAF92F4A581795&yid=D43C4A19B2EE3C0A&vid=27746BCEEE58E9DC&iid=B31275AF3241DB2D&sid=DDDA4F26E8AD3C0E&eid=9B1D77939DDB4B89&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=0&reference_num=18