%0 Journal Article
%T 脱氧核酶抑制近日基因period 1表达的实验研究
%A 周薇
%A 王跃锜
%A 刘延友
%A 彭文珍
%A 肖静
%A 朱彬
%A 王正荣
%J 中国科学 生命科学
%D 2005
%I 
%X 研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响, 进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法. 设计合成针对per 1的脱氧核酶DRz164, DRz256, 并构建pcDNA3-per1164256体外转录载体, 将转录产物和脱氧核酶混合, 在一定反应条件下进行体外切割反应, 地高辛酶联免疫及酶催化显色法检测脱氧核酶的体外切割效率. 将pcDNA3-per1和DRz164或DRz256在脂质体的介导下转染NIH3T3细胞, 通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)检测脱氧核酶对近日基因表达的影响. 于37℃孵育2 h后, DRz164对底物的剪切百分率为63%, DRz256为50.5%. RT-PCR半定量检测per1 mRNA表达水平明显下降, FCM结果显示细胞内Per1蛋白的合成受到抑制. 脱氧核酶DRz164, DRz256体外具有定点切割近日钟基因per1mRNA组分的活性, 使转染细胞per1 mRNA 和Per1蛋白表达下降.
%K Period
%K 1基因
%K 脱氧核酶
%K 体外切割
%K 基因转染
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=575F4BB93AAFB8E7&yid=2DD7160C83D0ACED&vid=6209D9E8050195F5&iid=0B39A22176CE99FB&sid=10F298ED9F164662&eid=89F76E117E9BDB76&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=0&reference_num=14