%0 Journal Article %T 大鼠电子传递黄素蛋白-泛醌氧化还原酶cDNA的克隆、功能表达和细胞定位 %A 黄圣兵 %A 宋玮 %A 林其谁 %J 中国科学 生命科学 %D 2005 %I %X 从大鼠肝线粒体纯化得到一个内膜结合蛋白,经蛋白酶水解发现丰度最高的两个肽段含有相同的一个14肽序列.BLAST同源搜索找到了与这个14肽对应的大鼠基因组DNA.利用RACE的方法得到一个完整开放阅读框的cDNA,编码含616个氨基酸残基的蛋白质序列.克隆得到的大鼠cDNA与人的ETF-QO具有很高的同源性.通过序列比较发现克隆得到的cDNA对应大鼠ETF-QO的蛋白前体ETF-QOp,而从大鼠肝线粒体纯化得到的内膜结合蛋白则是ETF—QO. 构建的pYES/ETF—QO在酵母中的表达产物富集于线粒体组分,并具有ETF—QO的氧化-还原活性, 因此获得了ETF-QO在酵母中的功能表达,表明ETF—QOpN端32肽是线粒体的引导肽,且FAD 及4Fe-4S]被正确地组装.ETF—QO在大鼠的心、肝、肾表达较高,而在脾与肺却很低.在动物细胞中表达了ETF—QOp的GFP融合蛋白,它在细胞内与线粒体的特异染料呈共定位. %K 电子传递黄素蛋白-泛醌氧化还原酶 %K 前体 %K 蛋白质纯化 %K 基因克隆 %K 组织特异性 %K 大鼠 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=9BE0F5C937322EB6&yid=2DD7160C83D0ACED&vid=6209D9E8050195F5&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=E44E40A2398D4F2A&eid=7AA74D31F1FF2DCE&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=0&reference_num=16