%0 Journal Article %T 登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点的研究 %A 赵卫 %A 范宝昌 %A 胡志君 %A 陈水平 %A 王鹏程 %A 苑锡同 %A 李晓萸 %A 于曼 %A 秦鄂德 %A 杨佩英 %J 中国科学 生命科学 %D 2002 %I %X pDVWS501为含有登革2型病毒全长cDNA的质粒, 可利用感染性转录体技术恢复为有活力的病毒MON501. 将MON501注射乳鼠脑内可引发脑炎症状, 其E蛋白的62, 203位分别为Glu, Asn. 采用OL-PCR方法把pDVWS501 E62位氨基酸突变为Lys, 得到质粒TB62; E203位氨基酸突变为Asp, 得到质粒TB203. 将pDVWS501, TB62和TB203酶切后体外转录得到全长登革2型病毒转录体, 应用电穿孔技术转染BHK-21细胞, 7天后收毒. RT-PCR证实有登革2型病毒存在, 接种C6/36细胞, 3~5 d可使其产生典型病变. 测定突变区域的序列, 结果表明得到了恢复病毒MON501和E62, E203位点突变的重组病毒HFT62, HFT203. 3株病毒均在其基因组5′端加"G", 3′端则与登革2型病毒野生株相同. 分别将3株病毒稀释至105~ 102 TCID50, 经脑内途径注射1日龄乳鼠, 发现与MON501相比, HFT62, HFT203在同一稀释度发病乳鼠的个数减少, 发病时间延长且差异显著, 表明E62, E203可能是登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点. %K 登革2型病毒 %K 毒力相关位点 %K 感染性转录体 %K 点突变 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=B42BF6BF6F7C9269&yid=C3ACC247184A22C1&vid=9971A5E270697F23&iid=B31275AF3241DB2D&sid=385E3C2062167B88&eid=C7A2B92569DF5458&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=0&reference_num=15