%0 Journal Article %T BmNPV和AcNPV扩大寄主域杂交重组病毒表达载体的构建和改进 %A 吴小锋 %A 曹翠平 %A 许雅香 %A 鲁兴萌 %J 中国科学 生命科学 %D 2004 %I %X 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographacalifornicanuclearpolyhedrosisvirus,简称AcNPV)和家蚕核型多角体病毒(Bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirus,简称BmNPV)表达系统是目前最主要的两类昆虫杆状病毒表达系统.两者各具特点,前者寄主昆虫个体较小,但寄主范围广、适合较大规模的细胞悬浮培养生产体系;而后者虽然寄主专一,但以个体较大、易饲养的家蚕为寄主,具有表达量高、特别适合产业化水平开发的要求.为了利用AcNPV和BmNPV各自的优势,扩大昆虫杆状病毒的寄主范围,以BmNPV为基础,利用决定病毒寄主范围的DNA解旋酶基因及同源重组原理,构建了介于BmNPV和AcNPV间的杂交重组病毒(hybridbaculovirusofAcNPVandBmNPV,简称HyNPV).这样构建的杂交重组病毒具有AcNPV和BmNPV的双重优点,既能感染所有AcNPV的寄主,又可以在家蚕中表达.以人碱性成纤维细胞成长因子基因作为应用实例,克隆构建了这样的一种重组杂交病毒,可在Sf21,Tn-5,BmN培养细胞及家蚕个体中穿梭表达.为了减少表达后重组蛋白的降解,利用基因敲除法删除了杆状病毒本身的一种主要蛋白酶-半胱氨酸蛋白酶基因,提高了重组蛋白的稳定性和表达效率. %K AcNPV %K BmNPV %K 寄主范围 %K 昆虫杆状病毒表达系统 %K 半胱氨酸蛋白酶基因 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=D70C487B6B24DC78&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=339D79302DF62549&iid=0B39A22176CE99FB&sid=3F0AF5EDBC960DB0&eid=F260CE035846B3B8&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=10&reference_num=16