%0 Journal Article
%T 转基因家蚕丝腺组织和转化家蚕培养细胞表达hIGF-Ⅰ
%A 赵越
%A 李曦
%A 曹广力
%A 薛仁宇
%A 贡成良
%J 中国科学 生命科学
%D 2009
%I 
%X 为实现在家蚕培养细胞和家蚕丝腺组织中表达人胰岛素样生长因子(hIGF-Ⅰ)基因,以家蚕丝胶基因启动子(Pser-1)驱动hIGF-Ⅰ基因,构建了带有家蚕杆状病毒ie-1启动子(Pie-1)控制的neo基因表达盒的转基因载体pigA3GFP-hIGF-ie-neo.在可表达转座酶的辅助质粒存在下,分别转染BmN培养细胞,以700~800μg/mL的G418筛选,获得了稳定转化细胞系.Western blotting分析可检测到hIGF-Ⅰ的特异性条带,ELISA检测结果显示,hIGF-I在5×105个细胞中的表达水平约7800pg.通过反向PCR分析表明,在转化细胞中外源DNA可通过随机整合或按照piggyBac特定的靶位点序列TTAA插入细胞基因组.转基因载体pigA3GFP-hIGF-ie-neo通过精子介导法导入蚕卵,利用neo,gfp基因的双重筛选,经过PCR和点杂交鉴定,获得了2头转基因家蚕.ELISA检测结果显示,在G1代hIGF-I在每克中部丝腺组织中的表达水平为2440pg左右.
%K piggyBac
%K 转化家蚕细胞
%K 转基因家蚕
%K 胰岛素样生长因子
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=81C3E73A96494694BD40890B3F1EE96D&yid=DE12191FBD62783C&vid=7C3A4C1EE6A45749&iid=DF92D298D3FF1E6E&sid=2E4E3741E8FB64E9&eid=47122BA7BE181C5A&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=2&reference_num=0