%0 Journal Article
%T Split内含肽高效介导转录激活因子的胞内融合
%A ① 中国科学院北京基因组研究所新药研发组
%A 北京
%A ② 中国科学院植物研究所
%A 北京
%J 中国科学 生命科学
%D 2008
%I 
%X Split内含肽可以通过反式剪接作用介导两个蛋白片段的共价连接.基于这一原理,利用来自于Synechocystis sp.strain PCC6803的天然split内含肽DnaEs作为蛋白剪接元件,通过其反式剪接作用介导了四环素阻遏蛋白(TetR)与1-型单纯疱疹病毒(HSV)的转录活化域(VP16)的共价连接,形成融合蛋白TV.应用RT-PCR技术以及荧光显微镜成像技术分别在mRNA转录水平与蛋白表达水平上研究了DnaEs的剪接活性,结果证明在细胞内DnaEs可以介导融合蛋白TV的产生.同时也对融合蛋白TV的转录活性进行了研究,并将其与通过重组DNA表达得到的同种蛋白的转录活性进行了比较,发现DnaEs介导的融合蛋白与基因重组得到的同种蛋白转录活性相似.此外,还研究了四环素类似物Dox对TV转录活性的调控,结果表明Dox可以明显抑制其转录活性.DnaEs介导转录激活因子融合,并启动下游报告基因表达的实验方法,为深入开展DnaEs的应用研究提供了重要实验依据.
%K DnaEs
%K 蛋白剪接
%K 四环素阻遏蛋白
%K 1-型单纯疱疹病毒
%K 转录活化域
%K 转录激活因子
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=DBE4ECF0864647819971514F9C47DC38&aid=227FFC6533BE7360A4B9FA3232B03073&yid=67289AFF6305E306&vid=16D8618C6164A3ED&iid=5D311CA918CA9A03&sid=C4B91B15F1F73E7E&eid=569BDAA4FEA0F7F9&journal_id=1006-9259&journal_name=中国科学C辑&referenced_num=0&reference_num=0