%0 Journal Article %T Construction of T7 phage display library from the anther of Honglian hybrid line of rice
红莲型水稻杂种F1花药噬菌体展示文库的构建 %A HU Chao-Feng %A PENG Xiao-Jue %A ZHOU Yang-Yong %A TAN Yan-Ping %A LI Shao-Qing %A ZHU Ying-Guo %A
胡朝凤 %A 彭晓珏 %A 周杨永 %A 谭艳平 %A 李绍清 %A 朱英国 %J 遗传 %D 2008 %I %X 噬菌体展示是研究蛋白质相互作用的重要手段,为深入研究红蓬型水稻不育和育性恢复的分子机理,以红莲型水稻杂种F1花药为材料,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA,在双链cDNA末端加上定向EcoRI/HindⅢ接头,再用EcoR I和HindⅢ消化接头,形成两端分别带有EcoR Ⅰ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA.经Mini Column纯化后,收集300 bp以上的双链cDNA片段,将其连接到带有EcoR Ⅰ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b载体上,经体外包装后,以BL T5403为受体菌构建了红莲水稻杂种F1花药的噬菌体展示文库.经测定显示,该噬菌体展示文库容量为1.03x106pfu/mL,重组率为100%,扩增后文库滴度为2.14×1012pfu/mL.对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,97%的插入片段大于300 bp. %K 水稻 %K 花药 %K 噬菌体展示 %K 文库构建 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=3E23F50E071DF18E21B2F5AEE4F1FA5E&aid=C56C9810A127611B8736076C47BB5880&yid=67289AFF6305E306&vid=340AC2BF8E7AB4FD&iid=B31275AF3241DB2D&sid=E3691231514F8E11&eid=FA519F4FF622280A&journal_id=0253-9772&journal_name=遗传&referenced_num=0&reference_num=19