%0 Journal Article %T The Modification of a Bacterial Artifical Chromosome Containing
用同源重组法修饰含人α类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体 The Modification of a Bacterial Artifical Chromosome Containing %A FENG Dong xiao %A LIU De pei %A HUANG Yue %A LIANG Zhi quan %A
冯东晓 %A 刘德培 %A 黄粤 %A 梁植权FENG Dong-xiao %A LIU De-pei %A HUANG Yue %A LIANG Zhi-quan %J 遗传 %D 2001 %I %X 采用RecA蛋白介导的同源重组的方法,对本实验室筛选出的包含完整人α-类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体(BAC)DNA进行删除修饰。首先采用PCR的方法,分别在预删除的HS-40增强子区域的上游和下游克隆长度约为500bp的两段同源序列,并一起克隆到构建载体pBV的XbaⅠ和HindⅢ位点上,SalⅠ酶切后回收1kb左右的片希并克隆温度敏感的穿梭质粒pSV-RecAk ,转化带有人α-类珠蛋白基因簇的BAC DNA的感受态大肠杆菌DH10B,经氯霉素正筛选和镰孢菌酸的负筛选,获得发生两次同源重组后只含BAC DNA而穿梭载体已丢失的菌株,经Southern杂交鉴定,获得了HS-40被定位删除的BAC突变体克隆。表明同源重组的方法可以对含有较多重复序列的BAC DNA进行准确的删除修饰。 %K 细菌人工染色体 %K 同源重组 %K α-珠蛋白 %K 修饰 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=3E23F50E071DF18E21B2F5AEE4F1FA5E&aid=06C37A18A60442E3&yid=14E7EF987E4155E6&vid=EA389574707BDED3&iid=38B194292C032A66&sid=3E0812ED84A7B31D&eid=AC1578C6BB9EBDEF&journal_id=0253-9772&journal_name=遗传&referenced_num=5&reference_num=7