%0 Journal Article %T 稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用 %A 赵建军 %A 闫如勋 %A 张海玲 %A 张蕾 %A 胡博 %A 白雪 %A 邵西群 %A 柴秀丽 %A 闫喜军 %A 吴威 %J 微生物学报 %D 2012 %I %X 摘要:【目的】信号淋巴激活分子(SLAM 又称CD150)为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的细胞受体。本研究目的在于建立稳定表达犬瘟热易感动物貉SLAM基因的Vero细胞系,用于犬瘟热诊断及CDV强毒株的快速分离。【方法】从重组质粒pMD-18-T-rSLAM扩增rSLAM 基因编码区,通过分子克隆技术构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-rSLAMhis。将该质粒转染Vero细胞后,经EGFP荧光观察、G418抗性压力和单细胞克隆化及RT-PCR筛选表达rSLAM阳性细胞系。应用获得细胞系对临床犬瘟热病例进行病毒分离,对分离得到CDV进行RT-PCR鉴定及动物回归试验。【结果】经过RT-PCR和免疫组化试验证实,本实验筛选获得一株能稳定表达rSLAM的Vero细胞系———Vero-rSLAM。该细胞系接种CDV阳性样品36-48h即可产生典型CDV致细胞融合病变,而其亲本Vero细胞接种至6d均无可见细胞病变出现。应用Vero-rSLAM细胞系从狐狸、貉犬瘟热阳性病料中分离获得了3株犬瘟热病毒。其中犬瘟热病毒LN(10)f1株对易感狐狸、貉均可产生致死性感染。【结论】成功建立了稳定表达rSLAM的Vero细胞系,用它分离的CDV对本动物保 持较强的毒力。 %K 关键词:犬瘟热病毒,貉,信号淋巴细胞激活分子,Vero细胞 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=4D6BB6A422263A456FE4A26EBA4E244A&yid=99E9153A83D4CB11&vid=286FB2D22CF8D013&iid=59906B3B2830C2C5&sid=6F185A924223F19E&eid=777A6C995272142B&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0